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第一節 概述

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北京明升體育生物技術有限公司

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第一節 概述

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  聚合酶鏈反應或多聚酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction, PCR) ,又稱無細胞克隆技術(“free bacteria”cloning technique) ,是一種對特定的DNA片段在體外進行快速擴增的新方法 。該方法一改傳統分子克隆技術的模式 ,不通過活細胞 ,操作簡便 ,在數小時內可使幾個拷貝的模板序列甚至一個DNA分子擴增107~108倍 ,大大提高了DNA的得率 。因此 ,現已廣泛應用到分子生物學研究的各個領域 。

  PCR技術最早由美國Cetus公司人類遺傳研究室Kary Mullis及同事於1985年發現並研製成功的;最早的應用報道是Saiki等1985年將PCR技術應用於β-珠蛋白基因擴增和鐮刀狀紅細胞貧血的產前診斷 。隨後使用了1976年Chien等分離的熱穩定性Taq DNA聚合酶 ,使PCR操作大為簡化 ,並使PCR自動化成為可能;1987年Kary Mullis等完成了自動化操作裝置 ,使PCR技術進行實用階段 。

  國內複旦大學1988年起開始研製耐熱性多聚酶 ,軍事醫學科學院馬立人教授等在1989年研製成功了PCR自動裝置 ,並且不斷推陳出新 ,最近研製的PTC-51A/B型DNA熱循環儀體積小 ,造型美觀 ,價格適宜 ,操作簡單 ,尤為適宜國內應用 。

  PCR發明不到10年 ,卻已獲得廣泛應用 。目前 ,每年都有上千篇文章 發表 。1991年 ,期刊“PCR方法與應用”(PCr Methods and Application)在美國創刊 ,使有關學者有了自己的論壇和參考的專業期刊 。PCR技術作為一種方法學革命 ,必將大大推動分子生物學各有關學科的研究 ,使其達到一個新的高度 。

  1993年度諾貝爾化學將已於10月13日揭曉 ,Kary Mullis因發明了“聚合酶鏈式反應”而獲得此殊榮 。現在世界各地都在使用PCR檢測病人血液中的微量遺傳物質 ,這一成就為精確診斷艾滋病及其它病症鋪平了道路 。瑞典皇家科學院說 :“PCR方法已經廣泛應用於生物醫學中 。該方法同DNA測序法結合起來很可能將成為研究動植物分類學的一種革新工具 。”一名加拿大籍英國科學家Michael Smith因開創了“寡核苷酸基因定點誘變”的方法而與Mullis同享此榮 。

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